程颖：循环细胞内在小细胞内肺癌临床研究中的进展

周而复始细胞内( Circulating tumor cells，CTCs)作为一种可替代原发的“液体活检骨骸”，已在移出性乳腺癌、癌和结直肠癌中会用做病状评价。小细胞内膀胱癌(Small celllung cancer，SCLC)秘密组织骨骸来源极低，且欠缺有效的检测患上移出和预报病状的脊椎动物圣万。近十年深入研究成果CTCs在SCLC中会的流引病学技术的发展来进引了聚焦性深入研究，见到CTCs对SCLC的病症、分阶段，检测患上、移出，评核、病状以及建立异化化学疗法律条文方案等具有极为重要意义，本文就CTCs在SCLC流引病学技术的发展中会的深入研究进展为由综述。

一、SCLC病患者CTCs的侦测作法律条文

CTCs的侦测作法律条文主要有流式细胞内侦测关键技术( fluocytometry，FCM)、逆转录一聚合酶裂解(reverse-transcriptionPCR，RT-PCR)、CellSearch系统、CTC芯片(CTC-chip)关键技术和膜切片分立细胞内关键技术(isolation by size of epithelial tumor cells．ISET)等，其中会CellSearch系统因其半自动化的操作游戏平台，较低的酪氨酸、诱发和可重复性，踏入最常技术的发展的CTCs侦测作法律条文。

早在2004年，Allard等率先技术的发展CelISearch法律条文侦测了99同上膀胱癌（未列举SCLC同上数）病患者的CTCs，随后Nagrath等采用CTC-chip法律条文侦测了55同上膀胱癌病患者水肿胭脂C TCs。2009年以后的深入研究多采用CeIISearch法律条文侦测SCI．C病患者水肿胭脂CTCs，然而该作法律条文由于对欠缺淋巴内形态的细胞内会注意到漏检意味著，且与免疫磁珠及抗体建构的CTCs不会律条文引某些后续的侦测，流引病学技术的发展受到单单。

近十年，随着基体科技产业的持续发展，载体CTCs微小圣万的酪氨酸识别分f结构上的基体材料建构微流控关键技术的CTCs侦测游戏平台的深入研究受到广泛技术的发展关注，2013年，《自然》（Nature）杂志将CTCs基体侦测选为最具创新性和裂解发展潜力的病症新作法律条文，成果令人瞩目。但就以外来看，这两项的CTCs侦测作法律条文各有利弊，未有深入研究猜测哪种作法律条文对SCLC的CTCs侦测更加有优势。着眼未来，亟须开发酪氨酸、诱发更加高的CTCs侦测关键技术，为SCLC的基础和流引病学深入研究产生打破。

二、CTCs在SCLC流引病学技术的发展中会的深入研究现状

（一）CTCs计数器与SCLC的病症、分阶段

近十年多项深入研究显露CTCs计数器高度与SCLC的病症、分阶段有的关系关系0 2009年Tanaka等技术的发展CeIISearch法律条文侦测了1 50同上7.5ml水肿胭脂CTCs，其中会膀胱癌1 25同上、非恶性25同上，膀胱癌病患者以外116同上非小细胞内膀胱癌(non-small cell lung cancer，NSCLC)和9同上SCLC。

深入研究结果显露SCLC病患者CTCs白血病率为66.70-/0（6同上／9同上），相比高于NSCLC病患者的CTCs白血病率(腺癌25.9%，鳞癌40.9%；腺癌对比SCLC，P

月，Hou等技术的发展CeIISearch法律条文侦测了50同上初治的SCLC病患者水肿胭脂CTCs，以外20同上单单期SCLC (limited disease，LD-SCLC)病患者和30同上广泛技术的发展期SCLC(extensive disease，ED-SCLC)病患者，高度线期ED-SCLC及LD-SCLC病患者的中会位CTCs计数器则有237和2个/7.5ml胭脂，7同上未检出CTCs的病患者均为LD-SCLC，假定CTCs计数器高度与SCLC分阶段无关。

相似的结论在2012年被长崎学者Naito等猜测，深入研究成果在51同上SCLC病患者中会立用CeIISearch法律条文侦测高度线期CTCs高度，结果显露ED-SCLC,病患者的中会位CTCs计数器为9.5个f 7.5ml胭脂，而LD-SCLC仅为1个／7.51111胭脂，进一步假定ED-SCLC病患者的CTCs高度高于LD-SCLC病患者。

（二）CTCs评核SCLC的及病状

CTCs是否可作为评核SCLC和病状的有救指f,匙深入研究成果们始终在探讨的问题。Houi等在2009年通过CellSearch法律条文侦测了50同上SCLC病患者(LD-SCLC20同上，ED-SCLC30同上)的CTCs，见到CTCs>300个/7.5ml胭脂的病患者及CTCs

高度线期CTCs>=50和

在该深入研究中会SCLC病患者的病状区从前绝对值设定8个/7.5ml胭脂，便是将病患者分为CTCs>=8及

Hiltermann等在2012年绝对值得注意技术的发展CellSearch法律条文侦测59同上SCLC病患者在高度线期、1短周期化学疗法律条文后及4短周期化学疗法律条文结束后外固胭脂CTCs高度，其中会ED-SCLC病患者38同上，LD-SCLC病患者2 1同上c高度线期有43同上病患者(730-/o)CTCs≥2个/7.5ml胭脂，CTCs>215个/7.5ml胭脂和CTCs

经过1短周期化学疗法律条文后病患者CTCs高度有所提高，且1短周期化学疗法律条文后CTCs

深入研究成果推断CTCs高度是SCLC病状的独立影响脊椎动物体，其中会1短周期化学疗法律条文后CTCs高度是SCLC和病状最强的预报脊椎动物体。

2013年ASCO发表的ECOG1508深入研究中会，深入研究成果尝试在155同上ED-SCLC中会加入载体化学疗法律条文，并对其中会123同上病患者高度线期CTCs来进引侦测，结果显露载体化学疗法律条文未能延长ED-SCLC病患者的PFS和OS，但见到高度线期CTCs≤l00和CTCs>100个／7.5ml胭脂的mPFS则有4.4和4.3个月（P=0.07），OS则有10.7和7.2个月(P=0.01)。深入研究成果认为虽然载体化学疗法律条文不用能提高ED-SCLC病患者的PFS和OS，但却见到了CTCs意味著是SCLC病患者的病状圣万。

最近，Igawa等尝试技术的发展OBP-401测试侦测SCLC病患者水肿胭脂CTCso技术的发展OBP-401测试侦测乳腺癌和胃癌病患者CTCs的无关深入研究已有中会后期华盛顿邮报。深入研究纳入30同上韧治的SCLC病患者，29同上病患者(96%)水肿胭脂CTCs白血病。在高度线期，21同上病患者CTCs

（三）CTCs检测SCLC的患上和移出

这两项的深入研究表明通过侦测CTCs的注意到来检测SCLC的患上和移出具有极为重要的流引病学意义o Tanaka等深入研究见到CTCs高度‘j 125同上膀胱癌病患者（以外9同上SCLC病患者）进展相比无关，特别是与所在位置移出的关系（AUC-ROC 0,873 p

基于这些数据，原作者认为CTCs可作为检测膀胱癌所在位置移出的脊椎动物标记物。Natio等深入研究见到SCLC在高度线期、化学疗法律条文结束后及患上后CTCs的白血病率则有68.6%、26.5%和67.6，示意SCLC患上后水肿学CTCs高度升高，发生所在位置移出脾脏的个数为0、1和>=2的病患者其中会位CTCs计数器则有2.0、7.5和21个/7.5ml胭脂,示意CTCs高度与所在位置移出脾脏的个数有关，所在位置移出越多，CTCs计数器越少（p

三、CTCs在SCLC流引病学技术的发展中会的聚焦方向

患上和移出是随之而来病患者化学疗法律条文失败和死亡的主要原因，及时见到的患上和移出并采敢积极有效的化学疗法律条文措施可显著提高病患者生存率。然而，由于SCLC欠缺尽可能检测患上和移出的脊椎动物圣万，且常规具体方法检查不会律条文见到微移出灶及微小残留软秘密组织，随之而来发生患上和移出的SCLC病患者只能及时接受病症和化学疗法律条文。

流引病学中会大多LD-SCLC的病患者病状相异较大，示意有些单单期的病患者在病症时意味著已发生了具体方法只能见到的微移出而踏入潜在的广泛技术的发展期病患者。通过侦测水肿胭脂CTCs的注意到及个数转变从而对SCLC病患者体液状况来进引可发挥作用、动态地检测和评价，及时见到的患上、移出，将有助于流引病学医师对化学疗法律条文及早的把握和化学疗法律条文策略的选项，但究竟CTCs的个数或转变绝对值为多更加少时尽可能正确凸显SCLC的患上或移出尚不明确，只能更加多的循证医学论据为由赞成。

CTCs在评核SCLC病患者化学疗法律条文方面的技术的发展尚保持稳定聚焦期中会，化学疗法律条文过程中会CTCs个数的转变与SCLC病患者化学疗法律条文的无关性及其与SCLC病患者放疗及早的选项等问题在未来须大量的流引病学深入研究。近5年，对CTCs是否可作为SCLC病患者病状指标的深入研究逐渐增多，但SCLC最佳的病状CTCs区从前绝对值尚不有定论，歧异颇多。

其中会3项来自Hou、Naito、Hiltermann的深入研究将SCLC的病状CTCs认定绝对值分别设定为50、8和2个／7.5ml胭脂，相异很大，这意味著与深入研究采用的统计学作法律条文不尽相同以及入组样本量较更加少有关。近期那不勒斯学者Normanno等论调将ED-SCLC和LD-SCLC病患者从前深入研究，对高度线期、l短周期化学疗法律条文后CTCs以及化学疗法律条文前后CTCs的转变绝对值分别设定病状区从前绝对值，为未来的深入研究提供了新的思路。笔者所在的科研团队也正作出贡献法制SCLC病患者病状最佳CTCs区从前绝对值的深入研究，结果令人期望。

的异化化学疗法律条文是化学疗法律条文方式在的持续发展方向。SCLC病患者对化学疗法律条文用药的反应存在相比的个体相异，其主要原因意味著与繁杂的一般而言、基因表达相异及多态性有关。所以，逐步明晰SCLC的遗传物质学形态对发挥作用真正意义上的SCLC异化化学疗法律条文尤为极为重要。近期法制学者王洁等深入研究医务人员通过技术的发展单细胞内基因测序方式对病患者单个CTC来进引以外遗传物质、肽链遗传物质测序。

在此项深入研究中会，谢晓亮教授发明的多重退火和加成周而复始的增量关键技术(MAIBAC)，成功发挥作用了对病患者水肿胭脂单个CTC的以外遗传物质增量和深度测序，在单个细胞内高度探测以外遗传物质基因拷贝数变异(CNVs)和单核苷酸变异(SNVs)o单细胞内高度CTCs遗传物质测序关键技术可及时提供如耐药基因突变等异化化学疗法律条文所须的极为重要信息，同时也为未来SCLC载体用药的开发提供关键技术赞成。

SCLC秘密组织骨骸难以提供，限制了后续各项检查和深入研究的开展，而利用CTCs构建的SCLC周而复始细胞内移植腺( CTC-derived explants，CDXs)模型，都未解决这一棘手难题。最近，Hodgkinson等尝试将6同上ED-SCLC病患者lOml水肿胭脂中会的CTCs提取后切除到免疫缺陷小鼠皮下，结果在4只小鼠身上产生了CDXs，假定SCLC病患者的CTCs具有致腺性。

同时技术的发展CelISearch法律条文侦测这6同上SCLC病患者的CTCs，结果显露成功产生CDXs的4同上病患者的CTCs计数器均>400个／7.5ml胭脂，而另外2同上未产生CDXs的病患者其CTCs计数器则有222和20个／7.5ml胭脂，示意SCLC的CTCs致腺性与水肿胭脂CTCs教量有关。进一步分析见到相较于化学疗法律条文诱发SCLC，化学疗法律条文酪氨酸SCLC病患者的CDXs大幅提高时间短、植被更加迅速。对3同上CDXs给予顺铂和逐步产生泊苷化学疗法律条文用药，其诱发顺序为CDX3>CDX2>CDX4，适当病患者的OS则有9.7.3.5.0.9个月，示意对CDXs来进引胃药敏测试可以间接反应病患者生存时间。

该深入研究显露大多SCLC的水肿胭脂CTCs具有干细胞内结构上，可来进引胃培养、产生与原发高度相似的CDXs，为SCLC病患者的胃药敏测试、耐药机制分析等一系列检查和深入研究提供了极更加少量的秘密组织，解决了SCLC病患者骨骸来源极低的问题。

结论

从现引的深入研究可以显露，虽然CTCs在SCLC中会的流引病学技术的发展仍保持稳定聚焦期中会，但大环境广阔。以外，诸多裂解性深入研究打算来进引中会，相信随着深入研究的不断深入，CTCs都未踏入SCLC的打破口，期望CTCs在SCLC的领域中会为我们产生惊艳。

主笔： 露